Ceretec 500 microgrammes, trousse radiopharmaceutique, boîte de 5 flacons de 10 ml

Ceretec est un médicament mis à disposition dans le milieu hospitalier sous forme de poudre pour solution injectable iv (5) (500 microgrammes).
Mis en vente le 07/12/1987 par GE HEALTHCARE SAS. Médicament pris en charge par les collectivités et rétrocédable par les pharmacies hospitalières par prolongation des conditions d'inscription.

 

À propos

Principes actifs

• Examétazime

Excipients

• Stanneux chlorure
• Sodium chlorure
• Présence de :
• Sodium

Classification ATC

• divers

  • produits radiopharmaceutiques à usage diagnostique

    • système nerveux central

      • dérivés du 99mtc-technetium

        • 99mtc-technetium examétazime

          • divers

            • produits radiopharmaceutiques à usage diagnostique

              • détection d'une inflammation et d'une infection

                • dérivés du 99mtc-technetium

                  • 99mtc-technetium cellules marquées par l'examétazime

Statut

Ce médicament est autorisé sur le marché depuis le 07/12/1987.

 

Indications : pourquoi le prendre?

Indications d’utilisation

• Scintigraphie pour le diagnostic des anomalies cérébrales régionales
• Détection des foyers infectieux ostéo-articulaires sur prothèse
• Diagnostic topographique des maladies inflammatoires intestinales

Indications thérapeutiques

Ce médicament est à usage diagnostique uniquement.

·         scintigraphie de perfusion cérébrale pour le diagnostic des anomalies cérébrales régionales,

·         après le marquage in vitro des leucocytes au ^99mTc:

o        détection des foyers infectieux ostéoarticulaires, en particulier sur prothèse.

o        diagnostic topographique des maladies inflammatoires intestinales (types maladie de Crohn et rectocolite hémorragique) lorsque les explorations habituelles sont contre-indiquées ou mises en défaut; diagnostic de différenciation entre lésions actives et inactives.

 

Contre indications : pourquoi ne pas le prendre ?

Hypersensibilité à la substance active ou à l'un des excipients.

 

Posologie et mode d'administration

Après reconstitution avec une solution injectable de pertechnétate (^99mT) de sodium:

·         Administration par voie intraveineuse pour les études scintigraphiques cérébrales.

·         Réinjection intraveineuse de leucocytes après marquage in vitro pour les études de foyers infectieux ou inflammatoires.

Instructions pour la préparation des radiopharmaceutiques : voir rubrique 12.

Scintigraphie chez l'adulte et le sujet âgé :

(I) Scintigraphie cérébrale

Activité recommandée, 350 à 500 MBq

La rétention cérébrale du traceur est obtenue dès 2 minutes après l'injection.

En l'absence de donnée clinique chez l'enfant, l'administration d'examétazime (^99mTc) est déconseillée. Dans le cas d'une étude de la perfusion en conditions basales, il est recommandé de mettre le patient au repos "neurosensoriel" pendant environ 20 minutes avant l'injection et 5 minutes après, l'acquisition d'images de l'encéphale peut alors débuter.

Bien que des anomalies flagrantes de la distribution cérébrale puissent être visualisées par scintigraphie planaire, il est fortement recommandé d'utiliser la tomographie d'émission monophotonique pour optimiser les résultats de l'étude.

(II) Localisation in vivo des leucocytes marqués au ^99mTc

Activité recommandée, 200 MBq

Des images dynamiques peuvent être acquises dans les 60 premières minutes après l'injection pour établir la clairance pulmonaire et pour visualiser la migration cellulaire immédiate.

Il est généralement conseillé de réaliser des images statistiques entre 0,5 et 1,5 heures, 2 et 4 heures et, si nécessaire, entre 18 et 24 heures après l'injection pour détecter toute accumulation locale de l'activité. Dans ce dernier cas, la distinction entre la localisation des leucocytes et la biodistribution normale doit être faite avec soin.

L'administration d'examétazime-(^99mTc) et de leucocytes marqués à l'examétazime-(^99mTc) est déconseillée chez l'enfant.

Poudre blanche.

 

Mises en garde et précautions d'emploi

La possibilité de survenue d'une hypersensibilité, y compris des signes ou symptômes graves d'anaphylaxie doit toujours être prise en compte. Des moyens de réanimation doivent être rapidement accessibles.

Lors de la préparation des leucocytes marqués à l'examétazime-(^99mTc), il est indispensable que les cellules soient débarrassées par lavage des agents de sédimentation avant d'être réinjectées au patient. En effet, les produits utilisés pour la séparation des cellules peuvent engendrer des réactions d'hypersensibilité.

Pour chaque patient, l'exposition aux rayonnements ionisants doit être justifiée par le bénéfice attendu. L'activité administrée doit correspondre à la plus faible dose de radiations possible compatible avec l'obtention de l'information diagnostique escomptée.

Pour une activité donnée, la quantité de sodium peut dans certains cas excéder 1 mmol. Cela est à prendre en compte chez les patients suivant un régime hyposodé strict.

 

Grossesse et allaitement

Grossesse

Aucune donnée n'est disponible sur l'utilisation de ce produit pendant la grossesse. Les études de toxicité sur la reproduction chez l'animal n'ont pas été réalisées.

Lorsqu'il est nécessaire d'administrer un médicament radiopharmaceutique à la femme en âge de procréer il est indispensable de s'informer de toute éventualité d'une grossesse. Toute femme n'ayant pas eu ses règles doit être considérée comme enceinte jusqu'à preuve du contraire. Dans l'incertitude, il est important de limiter l'exposition aux rayonnements au minimum compatible avec l'obtention de l'information clinique recherchée. L'utilisation de techniques de remplacement n'utilisant pas de rayonnements ionisants doit être envisagée.

Les radionucléides utilisés chez la femme enceinte délivrent également des doses de radiations au foetus. Pendant la grossesse, seuls des examens indispensables doivent être pratiqués, lorsque le bénéfice potentiel est supérieur au risque encouru par la mère et le foetus.

Allaitement

Avant d'administrer un médicament radiopharmaceutique à une femme en période d'allaitement, il est nécessaire d'envisager la possibilité de réaliser l'examen après l'arrêt de l'allaitement ou de s'assurer dans le cas contraire que le radiopharmaceutique choisi est le plus approprié compte tenu de l'éventuel passage de la radioactivité dans le lait.

Si une administration est indispensable, l'allaitement doit être interrompu pendant 12 heures et le lait produit pendant cette période doit être éliminé.

 

Interactions avec d'autres médicaments et autres formes d'interactions

Aucune étude d'interaction n'a été réalisée et aucune interaction n'a été rapportée à ce jour.

 

Effets indésirables

La fréquence des effets indésirables est définie comme suit :

Très fréquent (≥1/10), fréquent (≥1/100 à <1/10), peu fréquent (≥1/1000 à <1/100), rare (≥1/10000 à <1/1000), très rare (<1/10000) et inconnu (ne peut pas être estimé à partir des données disponibles).

Affections du système immunitaire

Inconnu : Hypersensibilité incluant rash, érythème, urticaire, angio-oedème, prurit, réaction anaphylactoïde ou choc anaphylactique.

Affections du système nerveux

Inconnu : Céphalées, sensations vertigineuses, paresthésies.

Affections vasculaires

Inconnu : Rougeurs.

Affections gastro-intestinales

Inconnu : Nausées, vomissements.

Troubles généraux et anomalies au site d'administration

Inconnu : Etat asthénique (malaise, fatigue).

L'exposition aux rayonnements ionisants est liée à l'induction de cancers et au développement potentiel d'anomalies héréditaires. La dose efficace étant de 4,7 mSv lorsque l'activité maximale recommandée de 500 MBq est administrée, ces effets indésirables sont considérés comme peu probables.

Déclaration des effets indésirables suspectés

La déclaration des effets indésirables suspectés après autorisation du médicament est importante. Elle permet une surveillance continue du rapport bénéfice/risque du médicament. Les professionnels de santé déclarent tout effet indésirable suspecté via le système national de déclaration : Agence nationale de sécurité du médicament et des produits de santé (Ansm) et réseau des Centres Régionaux de Pharmacovigilance - Site internet: www.ansm.sante.fr.

 

Surdosage

En cas de surdosage de radioactivité, des mictions et défécations fréquentes doivent être favorisées afin de diminuer la dose délivrée aux patients.

 

Effet sur l'aptitude à conduire des véhicules et à utiliser des machines

Les effets sur l'aptitude à conduire des véhicules et à utiliser des machines n'ont pas été étudiés.

 

Propriétés pharmacologiques

Classe pharmacothérapeutique :

·         Produit radiopharmaceutique à usage diagnostique, système nerveux central.

Code ATC : V09AA01.

·         Produit radiopharmaceutique à usage diagnostique, détection de l'inflammation et de l'infection.

Code ATC : V09HA02.

Aux concentrations chimiques et aux activités utilisées pour des examens diagnostiques, l'examétazime-(^99mTc) et les leucocytes marqués au ^99mTc semblent ne pas avoir d'effet pharmacodynamique.

DOSIMETRIE :

Le technétium-99m émet un rayonnement gamma d'énergie 140 keV. Sa demi-vie est de 6 heures. Le technétium-99 produit est quasi-stable.

(I) Scintigraphie cérébrale

D'après la CIPR 62 (Commission Internationale de Protection Radiologique), les doses estimées de radiations absorbées par divers organes après administration d'examétazime-(^99mTc) chez l'adulte sont les suivantes:

Organe	Dose de radiation absorbée par unité d'activité (mGy/MBq)
Surrénales	0,0053
Paroi vésicale	0,023
Surfaces osseuses	0,0051
Cerveau	0,0068
Seins	0,0020
Vésicule biliaire	0,018
Tube digestif
Paroi gastrique	0,0064
Intestin grêle	0,012
Paroi côlon ascendante	0,018
Paroi côlon descendante	0,015
Coeur	0,0037
Reins	0,034
Foie	0,0086
Poumons	0,011
Muscles	0,0028
Œsophage	0,0026
Ovaires	0,0066
Pancréas	0,0051
Moelle osseuse	0,0034
Peau	0,0016
Rate	0,0043
Testicules	0,0024
Thymus	0,0026
Thyroïde	0,026
Utérus	0,0066
Autres organes	0,0032
Dose efficace (E) mSv/MBq	0,0093

Soit, pour une activité injectée de 500 MBq et un individu de 70 kg, E = 4,7 mSv.

(II) Localisation in vivo des leucocytes marqués au ^99mTc

D'après la CIPR 80, les doses estimées de radiations γ absorbées par divers organes après administration intraveineuse de leucocytes marqués au ^99mTc chez l'adulte sont les suivantes:

Organe	Dose de radiation absorbée par unité d'activité (mGy/MBq)
	Adulte	15 ans	10 ans	5 ans	1 an
Surrénales	0,010	0,012	0,018	0,026	0,043
Paroi vésicale	0,0026	0,0035	0,0052	0,0078	0,014
Surfaces osseuses	0,016	0,021	0,034	0,061	0,15
Cerveau	0,0023	0,0029	0,0044	0,0070	0,013
Seins	0,0024	0,0029	0,0049	0,0076	0,013
Vésicule	0,0084	0,010	0,016	0,025	0,036
Tube digestif
Paroi gastrique	0,0081	0,0096	0,014	0,020	0,032
Intestin grêle	0,0046	0,0057	0,0087	0,013	0,021
Colon	0,0043	0,0054	0,0084	0,012	0,021
Paroi côlon ascendante	0,0047	0,0059	0,0093	0,014	0,023
Paroi côlon descendante	0,0037	0,0048	0,0073	0,010	0,018
Coeur	0,0094	0,012	0,017	0,025	0,044
Reins	0,012	0,014	0,022	0,032	0,054
Foie	0,020	0,026	0,038	0,054	0,097
Poumons	0,0078	0,0099	0,015	0,023	0,041
Muscles	0,0033	0,0041	0,0060	0,0089	0,016
Oesophage	0,0035	0,0042	0,0058	0,0086	0,015
Ovaires	0,0039	0,0050	0,0072	0,011	0,018
Pancréas	0,013	0,016	0,023	0,034	0,053
Moelle rouge	0,023	0,025	0,040	0,071	0,14
Peau	0,0018	0,0021	0,0034	0,0055	0,010
Rate	0,15	0,21	0,31	0,48	0,85
Testicules	0,0016	0,0021	0,0032	0,0051	0,0092
Thymus	0,0035	0,0042	0,0058	0,0086	0,015
Thyroïde	0,0029	0,0037	0,0058	0,0093	0,017
Uterus	0,0034	0,0043	0,0065	0,0097	0,016
Autres tissus	0,0034	0,0042	0,0063	0,0095	0,016
Dose efficace (E) mSv/MBq	0,011	0,014	0,022	0,034	0,062

Soit, pour une activité injectée de 200 MBq et un individu de 70 kg, E = 2,2 mSv.

(I) Injection intraveineuse directe

Distribution

Le principe actif forme avec le ^99mTc un complexe neutre et lipophile dont la masse moléculaire est suffisamment faible pour qu'il traverse la barrière hémato-encéphalique. Ce complexe est rapidement éliminé de la circulation sanguine après injection intraveineuse.

Fixation au niveau des organes

La fixation par l'encéphale atteint sa valeur maximale de 3,5 à 7,0 pour cent de l'activité injectée dans la minute qui suit l'injection.

Elimination

Jusqu'à 15 pour cent de l'activité localisée dans l'encéphale sont éliminés du cerveau dans les deux minutes qui suivent l'injection, ensuite la diminution d'activité reste faible au cours des 24 heures qui suivent. Elle est essentiellement liée à la décroissance physique du ^99mTc. L'activité non localisée dans l'encéphale est largement distribuée dans tout l'organisme notamment au niveau des muscles et des tissus mous. Immédiatement après l'injection, environ 20 pour cent de l'activité injectée sont captés par le foie et excrétés par voie biliaire. Au cours des 48 heures suivantes, environ 40 pour cent de l'activité injectée sont excrétés par le rein, entraînant une réduction générale du bruit de fond dû aux muscles et aux tissus mous.

Demi-vie

La demi-vie physique du ^99mTc est de 6,03 heures

La demi-vie biologique de l'examétazime-(^99mTc) administré par voie intraveineuse directe est d'environ 48 heures. 

Par conséquent, la demi-vie efficace de l'examétazime-(^99mTc) dans l'indication  de scintigraphie cérébrale est d'environ 5,3 heures.

(II) Injection de leucocytes marqués

Distribution

Les leucocytes marqués au ^99mTc se répartissent entre les compartiments des leucocytes marginés du foie (dans les 5 minutes) et de la rate (dans les 40 minutes) et le compartiment des leucocytes circulants (ce dernier représente environ 50 pour cent du pool de leucocytes). Environ 37 pour cent du ^99mTc associé aux cellules se retrouvent dans le compartiment circulant 40 minutes après l'injection.

Elimination

L'activité due au ^99mTc est lentement éluée des cellules et excrétée par voies urinaire et hépatobiliaire. Cela explique en partie une activité intestinale croissante.

Affections rénales/hépatiques

La pharmacocinétique chez les patients insuffisants rénaux ou hépatiques n'a pas été étudiée.

Demi-vie

La demi-vie physique du ^99mTc est de 6,03 heures

La demi-vie biologique de l'examétazime-(^99mTc) dans l'indication de marquage des leucocytes est d'environ 7 heures.

Par conséquent, la demi-vie efficace de l'examétazime-(^99mTc) dans l'indication de scintigraphie à l'aide de leucocytes marqués est d'environ 3,2 heures.

 

Durée et précautions particulières de conservation

Durée de conservation:

52 semaines après la date de fabrication.

Conserver le produit reconstitué entre 15° et 25°C. Ne pas congeler.Ne pas mettre au réfrigérateur. Le produit marqué doit être injecté dans les 30 minutes qui suivent la reconstitution.

Précautions particulières de conservation :

Conserver le produit avant ouverture entre 2°C et 25°C. Ne pas congeler.

Pour les conditions de conservation du médicament après reconstitution, voir rubrique Durée de conservation.

Le produit doit être stocké conformément à la réglementation nationale concernant les produits radioactifs.

En absence d'étude de compatibilité ce médicament ne doit être mélangé à aucun autre médicament

INSTRUCTIONS POUR LA PREPARATION DES RADIOPHARMACEUTIQUES :

Les médicaments radiopharmaceutiques ne peuvent être utilisés que par des personnes qualifiées, autorisées par les autorités compétentes à utiliser et manipuler des radioéléments. La réception, l'utilisation et l'administration des radiopharmaceutiques ne peuvent être effectuées que par des personnes autorisées dans des locaux spécialement équipés et habilités. La réception, le stockage, l'utilisation, le transfert et l'élimination des produits radiopharmaceutiques sont soumis à la réglementation en vigueur et aux autorisations appropriées des autorités nationales ou locales compétentes (voir rubrique Instructions pour l'utilisation, la manipulation et l'élimination).

L'administration de produit radiopharmaceutique présente des risques pour l'entourage du patient en raison de l'irradiation externe ou de la contamination par les urines, les vomissements, les expectorations, etc. Par conséquent, il faut prendre des mesures de protection contre les radiations conformément aux règlements nationaux.

Il est nécessaire d'observer les précautions de sécurité usuelles pour la manipulation de produits radioactifs.

La préparation d'un médicament radiopharmaceutique doit tenir compte des principes de radioprotection et de qualité pharmaceutique. Des précautions particulières d'asepsie doivent être prises pour assurer la stérilité de la préparation conformément aux exigences des Bonnes Pratiques de Fabrication des médicaments pharmaceutiques.

Les précautions usuelles de sécurité pour la manipulation des produits sanguins doivent être observées lors de la préparation et de l'administration des leucocytes marqués (voir aussi rubrique Mises en garde et précautions d'emploi).

A)    Protocole commun de préparation de l'examétazime-(^99mTc) pour injection intraveineuse et pour le marquage in vitro des leucocytes.

Respecter les règles d'asepsie pendant toute la manipulation.

(I)    Placer le flacon dans un récipient blindé approprié et essuyer le bouchon de caoutchouc avec le tampon imprégné d'alcool isopropylique fourni.

(II)    En utilisant une seringue blindée de 10 mL, prélever 0,5 à 1 GBq d'un éluat stérile, obtenu moins de 2 heures avant du générateur de Technétium-^99mTc dont la précédente élution date de moins de 24 heures. Amener à 5 mL avec une solution salée isotonique stérile, injecter ces 5 mL dans le flacon blindé. Avant de retirer l'aiguille du flacon, aspirer 5 mL de gaz en se plaçant au-dessus de la solution de façon à normaliser la pression à l'intérieur du flacon. Agiter le flacon pendant 10 secondes de façon à dissoudre complètement la poudre.

(III)   Mesurer l'activité totale et calculer le volume à injecter ou à utiliser pour le marquage in vitro des leucocytes au ^99mTc.

(IV)  Remplir l'étiquette fournie pour la solution reconstituée et la coller sur le flacon.

(V)   Utiliser la solution au plus tard dans les 30 minutes qui suivent la reconstitution.

Eliminer le matériel non utilisé. Le pH de la solution reconstituée est compris entre 9,0 et 9,8.

B)    Mesure de la pureté radiochimique

Cette mesure doit être faite dans les 30 minutes après reconstitution.

Trois impuretés radiochimiques peuvent être présentes dans la préparation injectable d'examétazime-(^99mTc) : le complexe secondaire d'examétazime-(^99mTc), du pertechnétate sous forme libre et du ^99mTc réduit et hydrolysé. Il est nécessaire d'associer deux systèmes de chromatographie pour obtenir la composition radiochimique du produit.

Des échantillons sont testés en effectuant avec une aiguille des dépôts à environ 2,5 cm de l'extrémité de deux bandelettes GMCP-SA (2cm (+ 2 mm) × 20 cm) ou similaire et en plaçant immédiatement l'extrémité de ces bandelettes dans un bac pour chromatographie ascendante contenant du solvant frais (1 cm de profondeur). Les solvants utilisés pour les deux bandelettes GMCP-SA sont d'une part de la butane-2-one et d'autre part du chlorure de sodium en solution aqueuse à 9 g/L. Après élution sur 14cm, les bandelettes sont retirées du bac et les fronts d'élution sont repérés. Les bandelettes sont séchées et la distribution de l'activité déterminée en utilisant un équipement adéquat.

C)    Interprétation des chromatogrammes

Système1(GMCP-SA : butane-2-one (méthyl éthyl cétone))

Le complexe secondaire d'examétazime-(^99mTc) et le ^99mTc réduit et hydrolysé ne migrent pas.

Le complexe lipophile d'examétazime-(^99mTc) et le pertechnétate ont un Rf compris entre 0,8 et 1,0.

Système 2 (GMCP-SA: Chlorure de sodium à 9 g/L)

Le complexe lipophile d'examétazime-(^99mTc), le complexe secondaire d'examétazime-(^99mTc) et le ^99mTc réduit et hydrolysé ne migrent pas.

Le pertechnétate a un Rf compris 0,8 et 1,0.

I. Calculer le pourcentage d'activité dû à la fois au complexe secondaire d'examétazime-(^99mTc), et au ^99mTc réduit et hydrolysé à partir du Système 1 (A %). Calculer le pourcentage d'activité dû au pertechnétate à partir du Système 2 (B%).

II. La pureté radiochimique (pourcentage de complexe lipophile d'examétazime-(^99mTc) est obtenue par l'équation :

100 - (A % + B %), où

A % représente le taux de complexe secondaire d'examétazime-(^99mTc) et le ^99mTc réduit et hydrolysé,

B % représente le taux de pertechnétate.

La pureté radiochimique obtenue doit être supérieure à 80 pour cent.

Cas particulier du marquage des leucocytes

Protocole de séparation des leucocytes et radiomarquage in vitro à l'examétazime-(^99mTc)

Respecter les règles strictes s'asepsie pendant  toute la manipulation

I.        Prélever 9 mL de tampon citrate-dextose-acide (ACD) (voir note 1) dans  deux seringues plastiques non-héparinées de 60 ml.

II.       Prélever 51 mL de sang du patient dans chaque seringue à l'aide d'une aiguille  Butterfly 19G pour perfusion. Obturer les seringues avec des capuchons stériles.

III.      Distribuer 2 mL d'agent de sédimentation dans 5 tubes en matière plastique. 

          L'amidon hydroxyéthyl 60 mg/mL est recommandé. (voir note 2).

VI.      Afin d'éviter la formation de bulles et de mousse, laisser 20 mL de sang s'écouler doucement le long de la paroi de chacun des cinq tubes contenant  l'agent de sédimentation. Mettre les 20 ml de sang restant dans un sixième tube ne contenant pas d'agent de sédimentation.

V.      Mélanger le sang et l'agent de sédimentation par agitation douce et faire éclater la bulle  éventuellement formée à l'ouverture du tube à l'aide d'une aiguille stérile. Reboucher les tubes et les laisser reposer un temps suffisant (30 à 60 minutes) pour obtenir la sédimentation  des érythrocytes.

VI.      Pendant ce temps, centrifuger le tube contenant 20 mL de sang sans agent de sédimentation à 2000 g pendant 10 minutes. Le surnageant ainsi obtenu est du plasma sans cellules (PSC1) contenant de l'ACD qui est conservé à température ambiante pour être utilisé comme milieu de marquage des cellules et de reconstitution de la suspension injectable.

VII.     Lorsque les hématies ont suffisamment sédimenté (voir (V)), transférer à l'aide d'une pipette plastique les surnageants troubles jaune paille dans des nouveaux tubes. Eviter d'entraîner des érythrocytes sédimentés. Ce surnageant est du plasma riche en leucocytes  et riche en plaquettes (PRLRP).

VIII.    Centrifuger le PRLRP  à 150 g pendant 5 minutes pour obtenir  un culot de leucocytes « mélangés » séparé du plasma riche en plaquettes (PRP).

IX.      Prélever autant de PRP que possible dans des tubes propres et centrifuger de nouveau à 2000 g pendant 10 minutes pour obtenir un nouveau surnageant : plasma sans cellule (PSC2) contenant l'agent de sédimentation. Ce dernier sera utilisé pour laver les cellules après le marquage.

X.       Pendant ce temps, désagréger le culot de leucocytes « mélangés » en tapotant et en faisant tourner très légèrement les tubes. A l'aide d'une pipette plastique, regrouper toutes les cellules dans un tube puis, à l'aide de la même pipette, ajouter 1 mL de plasma sans cellule contenant de l'ACD (étape (VI)) et remettre en suspension en agitant doucement par rotation.

XI.      Reconstituer un flacon de Ceretec avec 5 mL d'un éluat de générateur de ^99mTc contenant environ 500 MBq de ^99mTc0₄^- (selon le protocole décrit plus haut pour la préparation d'une injection intraveineuse).

XII.     Ajouter 4 mL de la solution d'examétazime-(^99mTc) obtenue immédiatement après la reconstitution à la suspension de leucocytes « mélangés » dans le PSC1 (étape (X)).

XIII.     Mélanger doucement par rotation  et incuber pendant 10 minutes à température ambiante.

XIV.    Pour établir la pureté radiochimique de l'examétazime-(^99mTc) réaliser immédiatement les dépôts sur les bandes de chromatographie, comme décrit dans la notice d'utilisation.

XV.     A la fin de l'incubation, ajouter délicatement 10 mL de PSC2 contenant l'agent de sédimentation (étape (IX)) à la suspension cellulaire, afin d'arrêter le marquage. Mélanger doucement les cellules.

XVI.    Centrifuger 5 minutes à 150 g.

XVII.   Prélever et conserver la totalité du surnageant. A ce stade du protocole, il est essentiel de prélever tout le surnageant contenant l'examétazime-(^99mTc) non lié.

XVIII.  Remettre doucement en suspension les leucocytes marqués au ^99mTc dans 5 à 10 mL de PSC₁  (étape (VI)). Mélanger doucement par rotation.

XIX.  Mesurer la radioactivité des cellules et du surnageant de l'étape (XVII). Calculer le rendement de marquage (RM) exprimé en pourcentage de l'activité cellulaire par rapport à l'activité totale des cellules et du surnageant.

Note : Le rendement de marquage dépend du nombre de leucocytes présents dans le prélèvement de sang initial. Il peut varier entre 30 et 55 pour cent.

XX.   Prélever délicatement les cellules marquées dans une seringue en plastique, non héparinée sans aiguille. La fermer avec un capuchon stérile. Mesurer la radioactivité.

XXI.  Les cellules marquées sont désormais prêtes à être réinjectées. Ceci doit être réalisé dans les plus brefs délais.

Note 1 :

Tampon citrate -dextrose (ACD)

Citrate trisodique............................. 22,0 g

Acide citrique.................................. 8,0 g

Dextrose......................................... 22,4 g

Eau ....................... qsp................. 1L

Stériliser par filtration sur filtre Millipore (0,2 µm).

Conserver à 0-25°C.

Note 2 :

Respecter les règles d'asepsie pour la préparation du tampon citrate-dextrose (ACD) et de l'amidon hydroxyéthyl 60mg/mL.

A défaut, des préparations commerciales peuvent également être utilisées. Les produits devront être conservés selon les recommandations du fabricant et utilisés dans les limites de leurs dates de péremption.

10 mL en flacon de verre transparent, fermé par un bouchon de caoutchouc chlorobutylé, scellé par une capsule en aluminium.

Boîte de 5 flacons.